铭修实验室- 2015版中国药典微生物检查培养基调整变更

铭修实验室-  2015版中国药典微生物检查培养基调整变更

一、 无菌检查 与2010版药典相比，2015版药典中将改良马丁培养基、营养肉汤和营养琼脂，修订为胰酪大豆胨液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基；方法验证试验修订为方法适用性试验；培养基的灵敏度和方法适用性试验也进行了修订。具体可参考中国药典2015 版附录征求意见稿—1101 无菌检查法 二、微生物限度检查：控制菌检查法 与2010版中国药典相比，在2015版药典中供试品制备方面增加了pH7.2 磷酸盐缓冲液和胰酪大豆胨肉汤。菌液制备方面胰酪大豆胨肉汤、胰酪大豆胨琼脂替代营养肉汤、营养琼脂；沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基替代改良马丁培养基、改良马丁琼脂培养基；梭菌增菌培养基替代硫乙醇酸盐流体培养基进行生孢梭菌菌液的制备。微生物计数环节，增加需氧菌的MPN 法计数 ；使用胰酪胨大豆琼脂替代营养琼脂进行需氧菌计数；使用沙氏葡萄糖琼脂替代玫瑰红钠琼脂进行霉菌和酵母菌总数测定，同时增加玫瑰红钠琼脂、沙氏葡萄糖琼脂(含抗生素)两种选择性培养基于对因沙氏葡萄糖琼脂上生长的细菌使霉菌和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求情况下的霉菌和酵母菌计数；取消酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)的酵母菌计数。耐盐革兰氏阴性菌的检验耐盐革兰氏阴性菌的检验使用肠道菌增菌液体培养基和紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基。大肠埃希菌(Escherichia coli)检验2015版药典中大肠埃希菌的选择和分离培养使用麦康凯液体培养基、麦康凯琼脂培养基，较2010版流程有所简化，并取消了对大肠菌群的检验。沙门菌（Salmonell）检验2015版药典中沙门氏菌的选择和分离培养使用RV 沙门菌增菌液体培养基，木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基，进一步鉴定使用三糖铁琼脂培养基。铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）检验铜绿假单胞菌的选择和分离培养使用溴化十六烷基*铵琼脂培养基，结合氧化酶试验进行判别，并取消了绿脓菌素的直接试验。金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）检验金黄色葡萄球菌的选择和分离培养使用甘露醇氯化钠琼脂培养基。取消了金黄色葡萄球菌的选择性增菌。梭菌（Clostridia）检验梭菌选择和分离培养使用哥伦比亚琼脂培养基，结合过氧化氢酶试验进行判别。白色念珠菌（Candida albicans）白色念珠菌的选择和分离培养使用沙氏葡萄糖琼脂培养基和念珠菌显色培养基，并取消了牙管试验。具体可参考中国药典2015 版附录征求意见稿—1106 非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法 中国药典2015 版附录征求意见稿—1105 非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法 三、抑菌效力检查法 抑菌效力检查部分参照欧洲药典对抑菌效力检查结果判断标准进行了修订，具体可参考： 中国药典2015 版附录征求意见稿—1121 抑菌效力检查法 四、制药用水检验 制药用水分为饮用水、纯化水、注射用水和灭菌注射用水，2015版药典中使用R2A琼脂培养基进行制药用水的检验，接轨欧美药典标准。