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冰冻切片淀粉样蛋白(AMYLOID)硫磺素S(thioflavine S)荧光染色试剂盒简介

更新时间:2023-09-21  |  点击率:1375

冰冻切片淀粉样蛋白(AMYLOID)硫磺素Sthioflavine S)荧光染色试剂盒

产品说明书(中文版)

主要用途

冰冻切片淀粉样蛋白(AMYLOID)硫磺素Sthioflavine S)荧光染色试剂是一种旨在使硫磺素S染色技术,与淀粉样蛋白结合,来分析存档中的冰冻组织切片中苹果绿荧光现象的*而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。主要适用于冰冻组织切片的淀粉样蛋白检测。广泛用于淀粉样蛋白样疾病的病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,荧光清晰。

技术背景

淀粉样蛋白(AMYLOID)是一种同质性、嗜伊红性(eosinophilic)、不溶性的纤维蛋白(fibrous protein)聚合体,具有共同的β交叉折叠层(β sheet)组织结构特征,沉积在细胞外。蛋白质错误折叠misfolding),且异常自我聚集将导致淀粉样变性(amyloidosis),细胞毒纤维沉积,产生组织损伤,进而引起23种不同淀粉样蛋白综合症,超过400种疾病,包括阿茨汉姆症、巴金森氏症、II型糖尿病、白内障、朊病毒疾病等。淀粉样蛋白斑(amyloid plaque)和神经纤维缠结(neurofibrillary tanglesNFT)是淀粉样蛋白综合征的病理性特征。硫磺素Sthioflavine S),苯并噻唑(benzothiazole)衍生物,含有至少6种成分,通过脱氢硫甲苯胺dehydrothiotoluidine与磺酸sulfonic acid的甲基化而成,是*的淀粉样蛋白荧光探针。较之硫磺素Tthioflavine T),硫磺素S更为特异,且结合能力强。一旦与淀粉样蛋白纤维结合,在荧光显微镜下(激发波长470nm,散发波长510nm),呈现苹果绿荧光。

 

产品内容

清理液(Reagent A

100毫升

固着液(Reagent B            10毫升

氧化液(Reagent C            10毫升

去干扰液(Reagent D          10毫升

染色液(Reagent E            10毫升

强化液(Reagent F            20毫升

稳定液(Reagent G            10毫升

产品说明书               1

保存方式

保存 染色液(Reagent E-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里; 染色液(Reagent E),避免光照;有效保证3

用户自备

(共聚焦)荧光显微镜:用于组织细胞染色后观察分析

实验步骤

一、 样本固着处理

1. 取出10片待测的冰冻组织切片

2. 小心加上200微升 清理液(Reagent A在切片上,铺满整个切片样品表面

3. 室温下孵育2分钟

4. 小心移去切片上的 清理液(Reagent A

5. 小心加上200微升 固着液(Reagent B在切片上,铺满整个切片样品表面

6. 室温下孵育5分钟

7. 小心移去切片上的 固着液(Reagent B

8. 小心加上200微升 清理液(Reagent A在切片上,铺满整个切片样品表面

9. 室温下孵育2分钟

10. 小心移去切片上的 清理液(Reagent A

二、样本染色处理

1. 小心加上200微升 氧化液(Reagent C,铺满整个片样品表面

2. 室温下孵育5分钟

3. 小心移去片上的 氧化液(Reagent C

4. 小心加上200微升 清理液(Reagent A在切片上,铺满整个切片样品表面

5. 室温下孵育1分钟

6. 小心移去切片上的 清理液(Reagent A

7. 小心加上200微升 去干扰液(Reagent D,铺满整个片样品表面

8. 室温下孵育5分钟

9. 小心移去片上的 去干扰液(Reagent D

10. 小心加上200微升 清理液(Reagent A在切片上,铺满整个切片样品表面

11. 室温下孵育1分钟

12. 小心移去切片上的 清理液(Reagent A

13. 小心加上200微升 染色液(Reagent E,铺满整个片样品表面

14. 室温下孵育8分钟,避免光照

15. 小心移去片上的 染色液(Reagent E

16. 小心加上200微升 强化液(Reagent F,铺满整个片样品表面

17. 室温下孵育1分钟

18. 小心移去片上的 强化液(Reagent F

19. 重复实验步骤1618一次

20. 小心加上200微升 清理液(Reagent A在切片上,铺满整个切片样品表面

21. 室温下孵育1分钟

22. 小心移去切片上的 清理液(Reagent A

23. 重复实验步骤2022二次

24. 小心加上200微升 稳定液(Reagent G,铺满整个片样品表面

25. 4冰箱里孵30分钟

26. 小心移去片上的 稳定液(Reagent G

27. 小心加上200微升 清理液(Reagent A在切片上,铺满整个切片样品表面

28. 室温下孵育1分钟

29. 小心移去切片上的 清理液(Reagent A

30. 封片

31. 即刻在(共聚焦)荧光显微镜下激发波长470nm,散发波长510nm观察:

淀粉样蛋白:呈现苹果绿荧光

注意事项

1. 本产品为50次操作

2. 操作时,须带手套

3. 本产品友好使用于双重染色或重叠染色,即首先进行常规免疫荧光染色,然后进行硫磺素S染色

4. 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面

5. 组织细胞染色完成后,即刻进行荧光显微镜观察

6. 用户可以使用DAPI滤波器波长进行观察

7. 本公司提供系列淀粉样蛋白染色试剂产品

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定荧光清晰

 

 

 

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