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冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒的操作规程

更新时间:2022-11-23  |  点击率:569
  冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒内质呈淡蓝黑色,外质收缩,剩下部分不着色或色泽更浅。圆形细胞核呈蓝黑色。居中的核仁呈黑色小圆点。核膜较薄,其内侧缘均匀,整齐地排列着一层细小的染色质粒。核仁与核膜之间可见到核网。被吞噬的红细胞呈蓝黑色采用苏木素染色液进行免疫染色后的复染,操作步骤简便,操作时间短。可以操作步骤简便,操作时间短或培养细胞的染色,或与免疫组织化学、免疫细胞化学、免疫荧光、原位杂交等配合使用。使用苏木素染色液染色后还可以进行免疫染色或其它染料的复染。
  冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒操作步骤(仅供参考)
  1、涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者或在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与的水混合均匀,涂成一薄层。
  2、干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
  3、固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次,每次1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。
  4、初染:滴加结晶紫染色液染色1~2min,清水冲洗去染色液。
  5、媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片,室温放置1~2min,水洗。
  6、脱色:滴加脱色液,摇动10~30s,直至流下的脱色液不出现紫色时为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
  7、复染:滴加沙黄染色液染色30s~1min,水洗。
  8、干燥。
  9、镜检:置油镜观察。
  冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒注意事项
  1、涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。
  2、取细菌时,应注意自我防护,拔或塞试管塞时,应将试管口通过火焰略加烧灼,zui后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
  3、加热固定涂片时,应注意玻片勿太靠近火焰,一般要求玻片温度不超过60℃,以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。
  4、革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度,脱色时间应根据经验判断。脱色过度,阳性菌可被误染为阴性菌;脱色不够,阴性菌可被误染为阳性菌。
  5、待检细菌培养时间也会影响染色效果,阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解,都常呈阴性反应。
  6、上述试剂均对人体有刺激性,请注意适当防护。
  
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