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活化部分凝血活酶时间(APTT)检测试剂盒产品说明书(中文版)

更新时间:2021-09-07  |  点击率:2784

活化部分凝血活酶时间(APTT检测试剂盒产品说明书(中文版)

 

主要用途

 

  活化部分凝血活酶时间(APTT检测试剂是一种旨在通过脑磷脂和鞣花酸反应物,与血浆样品混合,加入钙离子启动凝血反应,产生凝块,通过目测或凝血仪检测,来测定样品中凝块形成时间的*而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的其适用于各种动物和人体血浆样品凝血系统的检测,以及凝血因子和抑制剂的的筛选。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。

 

技术背景

 

活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin timeAPTT,又称为白陶土脑磷脂凝血时间(kaolin cephalin clotting timeKCCT),是指血浆在脑磷脂(缺乏组织因子的部分凝血活酶)、接触因子激活剂和钙离子等的参与下,形成纤维蛋白凝块(fibrin clot)所需的时间长度。其反映和检测血液系统内源性(intrinsic)又称为接触性激活通路(contact activation pathway)和常见(common)凝血通路或机制的生理或病理状况。内源性凝血通路或机制由凝血因子 891112、前激肽释放酶(prekallikrein)、高分子激肽原(high molecular weight kininogenHMWK)等构成;而常见通路由凝血因子12510等组成。正常活化部分凝血活酶时间通常为2540秒。活化部分凝血活酶时间用于筛选出血倾向的病人,即内源性凝血系统异常的病人;定量检测凝血因子2589101112等差异和缺陷;检测血液病理性凝血抑制剂,例如狼疮抗凝物(lupus anticoagulantLA);监测肝素抗凝血疗法和凝血因子替代疗法。维生素K缺乏、弥散性血管内凝血(disseminated intravascular coagulationDIC)、血管性血友病(Von Willebrand disease)、血友病(haemophilia)、遗传性无纤维蛋白原血症(congenital afibrinogenemia)、凝血因子缺陷、肝素、狼疮抗凝物等导致活化部分凝血活酶时间延长;而血栓性疾病则引起活化部分凝血活酶时间缩短。其检测方法在于使用血小板不足的血浆,血小板替代物磷脂(来自于兔脑、牛脑、大豆或脑磷脂等),接触因子激活剂包括白陶土(kaolin)、硅藻土(celite)、二氧化硅微粒(micronized silica),或鞣花酸(ellagic acid)等,混合在一起,加入钙离子后启动凝血反应。

 

产品内容

 

  抗凝液(Reagent A        毫升

  反应液(Reagent B          毫升

  催化液(Reagent C         

  标准液(Reagent D          微升(另购)

产品说明书              1

 

保存方式

 

保存在4冰箱里;有效保证3  反应液(Reagent B一旦启用,有效保证1

 

用户自备

 

2毫升离心管:用于样品操作的容器

1.5毫升离心管:用于样品反应的容器

微型台式离心机:用于样品操作

培养箱或恒温水槽:用于反应物孵育

计时器:用于反应计时

比色皿:用于样品凝血仪测定的容器

凝血仪:用于样品凝块形成分析

 

实验步骤

 

一、 血浆制备

 

1. 准备好2毫升离心管

2. 加入xx微升  抗凝液Reagent A 

3. 抽取1.8毫升血液  抗凝液Reagent A的离心管

4. 放进微型台式离心机离心10分钟,速度为3000g 

5. 小心移取上层黄色液体到新的2毫升离心管――此为血浆成分(注意:避免触碰白色液体层

6. 即刻置于冰槽里备用(注意:2小时内使用)

 

二、 测定准备

 

1. 准备好上述制备的血浆样品

2. 设定好凝血并预热

3.   催化液(Reagent C37恒温水槽均衡温度

 

三、 凝血测定(手工操作)

 

1. 准备好11.5毫升离心管

2. 移取xx微升  反应液(Reagent B

3. 放进37培养箱里孵育1分钟

4. 加入100微升上述制备的待测样品,混匀

5. 放进37培养箱里孵育3分钟(注意:不宜超过5分钟)

6. 即刻加入xx微升  催化液(Reagent C同时开启计时器进行计时(注意:以秒计时)

7. 倾斜离心管观察凝块形成,直至液体凝固;同时关闭计时器结束计时

8. 正常参考范围:

手工操作:2535

凝血仪操作:2331

 

注意事项

 

1. 本产品为20次操作,包括标准对照测定

2. 本产品检测敏感度达0.01国际单位Factor VIII含量

3. 操作时,须戴手套

4. 血液采集,避免使用肝素、EDTA、草酸抗凝管

5. 样品避免溶血,采血避免损伤组织

6. 血浆中血小板含量大于10000/毫升,以及含有雌激素、苯妥英、沃法令、纳洛酮、肝素等则干扰检测

7. 血浆样品避免反复冻融:4环境维持4小时;-20维持2月;-80维持6

8.   标准液(Reagent D为标准对照血浆

9. 建议用户建立自己的正常参考值范围

10. 用户可以使用各种自动和半自动凝血仪:例如Electra 600等进行检测,按照仪器操作手册操作

11. 本公司提供系列血液凝集检测试剂产品

 

质量标准

 

1. 本产品经鉴定性能稳定

2. 本产品经鉴定检测敏感

 

 


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