一、样品准备
1．准备好新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），并秤重以确定1克组织重量
2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管
3．（选择步骤）加入xx毫升 清理液（Reagent A）清洗1次
4．即刻用刀片切碎组织
5．放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6．加入预冷的xx毫升 裂解液（Reagent B）
7．涡旋震荡5秒，充分混匀
8．即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用研磨棒匀化组织（约80下）
9．将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管，放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）
10．小心移出上清液（注意：不要触碰沉淀物）到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管
11．（选择步骤）如果上清液含有肉眼可见的残渣，重复离心5分钟一次，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）
12．即刻移入到1.5毫升离心管
13．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－GMS30030.1）
14．放进－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用
二、测读准备
1．准备好上述制备好的样品，置于冰槽里融化
2．设定好分光光度仪：温度25℃，波长550nm，间隔10秒，测读7次（共60秒），并置零或设置0秒和60秒各测读1次
3．将－20℃冰箱里的试剂盒中的 反应液（Reagent D）置入冰槽里融化，然后移出100微升到新的1.5毫升离心管，加入xx微升 稳定液（Reagent E），轻柔混匀后，室温下暗室里静置至少15分钟（可见颜色变化），置于冰槽里，标记为 反应工作液（注意：参见注意事项5），放在暗室里
三、背景对照测定
1．移取xx微升 缓冲液（Reagent C）到新的1毫升比色皿
2．加入xx微升 稀释液（Reagent F）
3．上下倾倒数次，混匀
4．室温下孵育2分钟
5．放进分光光度仪，置零
6．取出比色皿，加入xx微升含有 反应液（Reagent D）和 稳定液（Reagent E）的 反应工作液
7．上下倾倒数次，混匀
8．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照（0秒读数－60秒读数）
四、样品测定
1．移取xx微升 缓冲液（Reagent C）到新的比色皿
2．加入100微升待测样品（注意：建议总量50微克总蛋白，且样品需澄清）
3．上下倾倒数次，混匀
4．室温下孵育2分钟
5．放进分光光度仪，置零
6．取出比色皿，加入xx微升含有 反应液（Reagent D）和 稳定液（Reagent E）的 反应工作液
7．即刻上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）
8．即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数（0秒读数－60秒读数）
9．计算样品活性
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