您好!欢迎访问铭修(上海)生物科技有限公司网站!
全国服务咨询热线:

18930233920

当前位置:首页 > 技术文章 > 细胞衰老特异性晚期脂褐素铁还原法(SCHMORL)染色试剂盒

细胞衰老特异性晚期脂褐素铁还原法(SCHMORL)染色试剂盒

更新时间:2020-05-08  |  点击率:2204

MB80070.1 v.A

 

 细胞衰老特异性晚期脂褐素铁还原法(SCHMORL)染色试剂盒产品说明书

(中文版)

 

主要用途

 

 细胞衰老特异性晚期脂褐素铁还原法(SCHMORL)染色试剂是一种旨在使用铁还原法技术,分析细胞样品中晚期脂褐素沉积现象,从而在光学显微镜下观察到色表达的细胞作为细胞复制性衰老replicative senescence)的分子特征来识别和探测衰老细胞的*而经典的技术方法。该技术经过精心改良SCHMORL方法、成功实验证明的。主要适用于动物细胞的的晚期脂褐素检测。广泛应用于细胞生物学研究产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。  

 

技术背景

 

细胞复制性衰老是细胞控制其生长潜能的保障机制。衰老细胞停滞在细胞周期的G1期,表现出细胞扁平、胀大、颗粒增多的形态特征,其中脂褐素颗粒聚集增多成为细胞衰老的特征性生物学标记。脂褐素(lipofusin),又称为“磨损(wear and tear)”色素,是一种细胞内与年龄相关的棕黄色荧光胞浆颗粒色素,主要在有丝分裂后细胞的继发性溶酶体内。脂褐素常见于老年人的永恒性非分裂性组织细胞里,例如心脏、肝脏和神经等,尤其在衰老诱导的细胞退变中聚集增多,特别是萎缩的组织。脂褐素来自于氧化的蛋白和脂质,成为细胞衰老中后期的独立指征。脂褐素分为早期和晚期,晚期脂褐素作为较强还原性物质,在铁离子的存在下,使铁*(ferricyanide)转化为亚铁*(ferrocyanide),产生不可溶性普鲁士蓝(Prussian blue)产物,显示蓝色。

  

产品内容

 

 清理液(Reagent A)       毫升

 固着液(Reagent B)  毫升

 染色液(Reagent C)  毫升

 酸性液(Reagent D)  毫升

产品说明书     1份

 

保存方式

 

保存在4冰箱里;  染色液(Reagent C)避免光照;有效保证3月

 

用户自备

 

小型染色缸:用于细胞染色操作

光学显微镜:用于观察染色后的细胞

 

 

 

 

实验步骤

 

操作一:细胞载玻片染色

 

  • 取出待测的细胞载玻片或细胞涂片 
  • 小心加上xx微升 清理液(Reagent A在载玻片上,铺满整个样品表面
  • 小心移去载玻片上的 清理液(Reagent A
  • 小心加上xx微升 固着液(Reagent B在载玻片上,铺满整个样品表面
  • 在室温下孵育5分钟
  • 小心移去载玻片上的 固着液(Reagent B
  • 小心加上xx微升 清理液(Reagent A),清洗样品表面
  • 在室温下孵育2分钟
  • 小心移去载玻片上的 清理液(Reagent A
  • 小心加上xx微升 染色液(Reagent C在载玻片上,铺满整个样品表面
  • 在室温下孵育10分钟
  • 小心移去载玻片上的 染色液(Reagent C
  • 小心将载玻片置入xx毫升 清理液(Reagent A的小型染色缸里 
  • 室温下孵育2分钟
  • 取出载玻片片,小心移去载玻片上的 清理液(Reagent A
  • 小心加上xx微升 酸性液(Reagent D在载玻片上,铺满整个样品表面
  • 在室温下孵育5分钟
  • 小心移去载玻片上的 酸性液(Reagent D
  • 小心加上xx微升 清理液(Reagent A),清洗样品表面
  • 小心移去载玻片上的 清理液(Reagent A
  • (选择步骤)复染(建议使用 核固红复染试剂盒——GMS40011)
  • 放上盖玻片或封片(水相或中性树脂)
  • 即刻在一般光学显微镜下观察:脂褐素阳性细胞呈现色,细胞核呈现红色(如果复染)

 

操作二:24孔细胞培养板染色

 

  • 小心抽去24孔细胞培养板里的培养液
  • 每孔加入xx微升 清理液(Reagent A,清洗生长中的细胞表面
  • 小心抽去每孔里的 清理液(Reagent A
  • 每孔加入xx微升 固着液(Reagent B覆盖整个生长表面
  • 在室温下孵育5分钟
  • 小心抽去每孔里的 固着液(Reagent B
  • 每孔加入xx微升 清理液(Reagent A,清洗细胞表面
  • 在室温下孵育2分钟
  • 小心抽去 清理液(Reagent A
  • 每孔加入xx微 染色液(Reagent C,覆盖整个生长表面
  • 在室温下孵育10分钟
  • 小心抽去 染色液(Reagent C
  • 每孔加入xx微升 清理液(Reagent A,清洗细胞表面
  • 在室温下孵育2分钟
  • 小心抽去 清理液(Reagent A
  • 重复实验步骤13至15二次
  • 小心加上xx微升 酸性液(Reagent D,覆盖整个生长表面
  • 室温下孵育5分钟
  • 小心抽去 酸性液(Reagent D
  • 小心加入xx微升 清理液(Reagent A
  • 小心抽去 清理液(Reagent A
  • (选择步骤)复染(建议使用 核固红复染试剂盒——GMS40011)
  • 小心加入xx微升 清理液(Reagent A
  • 即刻在一般光学显微镜下观察:脂褐素阳性细胞呈现蓝色细胞核呈现红色(如果复染)

 

注意事项

 

  • 本产品为50次(细胞载玻片)和25次(124孔板)操作
  • 本产品还可以染色其它还原性物质,包括黑色素(melanin)、肝胆汁(liver bile)、肠嗜铬细胞(enterochromaffin)等
  • 操作时,须戴手套
  • 使用时,避免污染母液
  •  染色液(Reagent C)避免光照
  • 试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面
  • 染色完成后,即刻进行光学显微镜观察
  • 本公司提供系列细胞衰老分析试剂产品

 

质量标准

 

  • 本产品经鉴定性能稳定
  • 本产品经鉴定着色清晰 

 

 

扫一扫,关注微信
地址:上海市杨浦区武宁路269号 传真:86-021-55825868
©2024 铭修(上海)生物科技有限公司 版权所有 All Rights Reserved.  备案号:沪ICP备16032190号-1