细胞钙离子浓度比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
细胞钙离子浓度比色法定量检测试剂是一种旨在通过邻甲酚酞络合酮,在碱性条件下与钙离子反应产生紫蓝色复合物,在分光光度仪下通过吸光峰值的变化,即采用比色法来测定样品中总钙离子浓度的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞(动物、人体等)裂解萃取样品中总钙离子的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,检测敏感。
技术背景
钙是人体中的一种重要电介质和矿物质,占1150克。其中99%的钙以氟磷灰石钙(calcium fluorophosphate apatite)形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式:一种是非弥散型蛋白结合钙,其构成约40%至50%的血清中的总钙含量;另一种为弥散型游离钙,其进一步分成具有活性的复合钙(complexed calcium)和离子钙(ionized calcium)。钙对神经肌肉兴奋性(neuromuscular excitability)、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法(flame photometry)、原子吸收分光光度法等技术,但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰,或者受限于仪器的特殊的要求。邻甲酚酞络合酮(o-cresolphthalein complexone;CPC)比色法是一种稳定、简便、准确的钙检测技术。钙与邻甲酚酞络合酮,在碱性条件下反应产生紫蓝色复合物,在分光光度仪下通过吸光峰值的变化(波长570nm),来定量测定细胞钙的总浓度。其反应系统为:
OH-
Ca++ + o-cresolphthalein complexone → violet complex dye
产品内容
清理液(Reagent A) 120毫升
裂解液(Reagent B) 5毫升
缓冲液(Reagent C) 20毫升
反应液(Reagent D) 2.5毫升
标准液(Reagent E) 500微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里; 缓冲液(Reagent C)、 反应液(Reagent D)和 标准液(Reagent E)避免光照;有效保证6月
用户自备
15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
1.5毫升离心管:用于标准样品配制和样品保存的容器
细胞刮脱棒:用于贴壁细胞脱离
微型台式离心机:用于样品制备
比色皿:用于反应的容器
分光光度仪:用于比色分析
实验步骤
管号 | 缓冲液(Reagent C) | 标准液(Reagent E) | 标准钙浓度 |
1 | -- | 200微升 | 0.5毫摩尔/升 |
2 | 100微升 | 100微升1号管 | 0.25毫摩尔/升 |
3 | 100微升 | 100微升2号管 | 0.125毫摩尔/升 |
4 | 100微升 | 100微升3号管 | 0.0625毫摩尔/升 |
5 | 100微升 | 0 | 0 |
三、比色测定
【根据标准曲线获得样品对应钙浓度(毫摩尔/升) X 样品稀释倍数】=毫摩尔/升
注意事项
质量标准
电话
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