冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒操作使用问题详细介绍说明

　　1. 控制好染色步骤；

　　2. 组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定溶液可延长或缩短染色时间；0.2%冰醋酸水溶溶液洗，可使色调清晰鲜艳；

　　3. 磷钼酸水溶溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制， 肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。

　　冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒广泛存在于动物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并产生H2O2，是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。

　　测定原理：GOD催化产生H2O2，过氧化物酶在有氧存在时催化H2O2分解产生的氧又将邻联茴香胺氧化生成有色物质，颜色深浅与葡萄糖氧化酶活性成线性关系。

　　是人体内zui普遍的、不可缺乏的条件性必需氨基酸，是构成蛋白质*的氨基酸之一，更是某些细胞培养中zui基本的元素。由于谷氨酰胺不稳定的特性，在细胞培养基的整合中，易自发性分解为谷氨酸和氨离子，而氨离子对细胞的毒性很强，因此，在细胞培养体系中，须密切关注谷氨酰胺的储存寿命（SHELF LIFE）和实时监测。在谷氨酰胺酶和谷氨酸脱氢酶的双酶循环反应系统中，L-谷氨酰胺首先发生脱氨基反应，产生谷氨酸和氨离子；进一步氨与2-酮戊二酸反应再次产生谷氨酸，同时将还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸即测定NADPH（340nm  波长）的浓度变化

　　冰冻切片细胞色素C氧化酶活性染色试剂盒样品收集、处理及保存方法

　　1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。

　　3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。

　　4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。

　　5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

　　自备物品

　　15毫升锥形离心管：用于制备样品的容器

　　比色皿：用于比色的容器

　　96孔酶标板：用于比色的容器

　　分光光度仪：用于比色分析

　　酶标仪：用于微量样品比色分析