铭修生物实验室---气密针式顶空法测定药典中溶剂残留

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开发1种以气密针式顶空测定药品中溶剂残留，根据不同的药品剂型测定溶剂残留。对于药典中要求测定溶剂残留的药品，多采用六通阀-定量环式顶空分析，本方法采用气密针式顶空对其进行分析，测得结果准确，重现性好，适用于药品中溶剂残留的分析。

引言

由于药品在生产储存过程中经常会引入各种残留溶剂，为了保证药品的质量和用药安全，对原料药及药品辅料在生产中溶剂残留的控制尤为重要。2010版中国药典二部附录中残留溶剂测定法的指导原则主要采用顶空气相色谱法，同时测定几种有机溶剂。针对不同的药品溶解性不同，本方法主要采用两种分析方法将常见溶剂残留分两类进行分析测定。结果准确可靠，重现性好。

标准溶液的制备

两组溶剂配制浓度如下表，其中难溶于水的溶解在N,N-二甲基甲酰胺中，易溶于水的则以水为溶剂。低浓度1.33-7.10mg/mL，高浓度：79.8-473.33mg/mL的校准储备溶液，逐级稀释至以下浓度。

样品制备

准确量取药品0.5g置于20mL顶空瓶中，加入5mL水或3mLN,N-二甲基甲酰胺，振摇使溶解其中以水溶解的药品中加入0.5g氯化钠密封，作为供试品溶液待测。

气相色谱条件

仪器条件见表 1。

结果与讨论

顶空条件的优化

根据不同药品溶解性不同，本实验选取了水及N,N-二甲基甲酰胺做为溶剂,因此顶空温度不易过高，因此选择60℃做为顶空的平衡温度，在该平衡温度下,各色谱峰响应值在15min均达到大值，即此时顶空的气-液两相已基本达到平衡，这里平衡时间不宜过长，如果过长，可能引起顶空瓶的气密性变差，导致定量的准确性降低，时间过短又可能导致灵敏度差。由此，本实验中选择15min做为顶空平衡时间。对于本实验采用气密针式顶空，实验中将气体进样针温度设置为90℃，在该温度下可保证样品不在进样针处冷凝，有效保证进样量的完整性。

色谱柱的选择

对于溶剂残留色谱柱，根据所分析物质不同可选择TG-5，TG-1，TG-wax，TG-624等均可分析，对于有些样品中存在干扰峰的不同来选择色谱柱。另外对于苯系物的分离，如要对二甲苯类分别定量的方法则要选择极性的聚乙二醇类型柱子，而对于要求分离较多物质的方法推荐采用TG-624色谱柱。本方法中根据不同溶解性药品，将所有溶剂残留分为两类，一类为可溶于水的图1，一类为难溶于水的图2。如下图为21种溶剂残留的色谱图3。

线性、检出限及 RSD

配制浓度水平：level1-5水平的校准溶液，采用上述方法分别进样分析，考察各组分在该浓度范围内的线性。实验结果表明21种组分在该范围内线性关系良好，线性相关系数均大于0.99（见表4）。

对药品添加混合标准溶液（加标浓度水平level1、level2），考察21种溶剂残留的加标回收情况。实验结果表明各组分的加标回收率均在83-100%之间，符合日常分析检测的要求。对level1、level2加标水平平行测定6次，平均RSD值在2.4-8.7%，符合稳定性要求。同时以三倍信噪比计算各组分检出限，各组分检出限在0.2-14μg/mL之间。

实际样品测试

利用建立的分析方法，测试某未知药品。实验结果表明：本方法能够测定药品中的溶剂残留，另外对于某些药品含有基质较复杂，建议将后程序升温的温度选择在较高水平，以保证没有对色谱柱的污染。