冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂是一种旨在使用人工电子受体染料二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝(MTT),受到NADH心肌黄酶催化还原,产生不溶性蓝黑*素沉淀,来分析冰冻组织样品中酶活性的而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于动物组织细胞的心肌黄酶活性定性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。
技术背景
心肌黄酶(Diaphorase),又称为硫辛酰胺脱氢酶(lipoamide dehydrogenase),黄递酶,二氢硫辛酰胺脱氢酶(dihydrolipoamide dehydrogenase),二氢硫辛酸脱氢酶(dihydrolipoyl dehydrogenase)等。因早期从猪心肌中提取,产品又呈现荧光的黄绿色蛋白质,故被称为心肌黄酶。分子量102000至110000。NADH心肌黄酶直接和黄素蛋白(Flavoprotein)反应,释放出氢原子,将氧化型黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)还原为还原型黄素腺嘌呤二核苷酸(FADH2),传递氢原子给氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD),而形成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH),作为电子供体,还原人工电子受体,例如染料四氮唑兰(tetrazolium)化合物,包括硝基蓝四氮唑(Nitro Blue Tetrazolium;NBT)和二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide;MTT),产生不溶性甲暨色素,由此用于鉴别内脏神经组织等各种动物组织。
产品内容
清理液(Reagent A) 100毫升
染色液(Reagent B) 10毫升
反应液(Reagent C) 1毫升
固着液(Reagent D) 10毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存 染色液(Reagent B)和 反应液(Reagent C)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器
培养箱:用于反应孵育
中性树脂:用于切片封片
光学显微镜:用于切片染色后观察分析
实验步骤
染色开始前,将-20℃冰箱里的试剂置于室温下融化;移取900微升 染色液(Reagent B)到新的1.5毫升离心管,加入100微升 反应液(Reagent C),混匀后,标记为 染色工作液,置于冰槽里,避免光照。然后进行下列操作。
注意事项
质量标准
电话
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