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Western抗体洗脱液中文版说明书
点击次数:469 发布时间:2017-12-28

Western抗体洗脱液中文版说明书

产品简介:

Western抗体洗脱液(Stripping buffer)又称膜再生液或Western一抗二抗去除液,用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测GAPDH、β-actin等表达量相对稳定的管家蛋白或其它蛋白作为参照。Stripping buffer可以洗脱一抗二抗,非常方便地重新利用使用过的膜,检测其它蛋白。 Stripping buffer多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱不宜重复利用膜,一般可以利用2~3次。

MBWestern Stripping buffer 主要依靠碱性来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失, 适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复利用,尤其适用于PVDF膜,其次为硝酸纤维素膜。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB,NBT/BCIP)不适用于本试剂。

产品组成:

                        编号

名称

PW0053

PW0053

Storage

Western Stripping buffer(碱性)

100ml

500ml

RT

使用说明书

1份

 

自备材料:

1、 蒸馏水

2、 摇床

3、 (可选)滤纸

4、 Western封闭液

操作步骤(仅供参考)

1、在膜完成Western化学发光检测后,蒸馏水中漂洗5min。

2、弃蒸馏水,加入Western Stripping buffer,完全覆盖住膜。

3、摇床上漂洗5min。

4、弃液,尽量把Western Stripping buffer去除干净,必要情况下,可以用滤纸吸干。

5、加入蒸馏水振荡漂洗2~3次,每次漂洗3~5min。

6、入封闭液进行封闭后(推荐酪氨酸或脱脂奶粉作为封闭液),进行Western后续操作。

注意事项:

使用辣根过氧化物酶标记的抗体时,封闭液必须使用5%脱脂奶粉配制。使用碱性磷酸酯酶标记的抗体时,封闭液必须使用酪蛋白(casein)配制。

Western Stripping buffer(碱性)特别适用于PVDF膜的再生,硝酸纤维素膜的再生效果不如PVDF膜。

Western Stripping buffer(碱性)适用于ECL等类似的化学发光液的检测后的一抗二抗洗脱。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB,NBT/BCIP)不适用于本试剂。

Western Stripping buffer(碱性)有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12个月有效。

 

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