冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氯荧光乙酰乙酸盐,在组织氧化损伤条件下,产生荧光,来定量检测冰冻组织内活性氧族的存在状况的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适宜于冰冻动物组织的分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,定性检测,性能稳定。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡。2',7'-二氯荧光乙酰乙酸盐(2',7'-dichlorofluorescein diacetate,DCFH-DA)一种*自由通过细胞膜的染色剂。一旦被过氧化氢、过氧化基、过氧亚硝基阴离子等氧化,便产生荧光。据此测定组织细胞内活性氧族的浓度。
产品内容
清理液(Reagent A) 50毫升
染色液(Reagent B) 100微升
稀释液(Reagent C) 50毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存 染色液(Reagent B)在-20℃冰箱里,严格避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于工作液配制的容器
培养箱:用于染色孵育
荧光显微镜:用于观察荧光组织
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的 染色液(Reagent B)置入冰槽里融化, 稀释液(Reagent C)置于室温预热。然后移出10微升 染色液(Reagent B)到新的1.5毫升离心管,加入990微升 稀释液(Reagent C),混匀后,标记为 染色工作液,置入暗室里。然后进行下列操作。
注意事项
质量标准
电话
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